Идентификация и оценка зрелости ооцитов
Идентификация и оценка зрелости ооцитов — это процедура, проводимая в лабораторных условиях и направленная на распознавание яйцеклеток в фолликулярном аспирате, а также оценке их способности к оплодотворению.
Оценка дается согласно результатам микроскопического изучения содержимого фолликула и имеет большое значение в подготовке материала для искусственного оплодотворения. От того, насколько пригодны яйцеклетки к проведению дальнейших процедур, зависит эффект процедуры ЭКО.
Во время пункции фолликулов вместе с ооцит-кумулюс производится забор фолликулярного эпителия, фибриноген в фолликулярной жидкости способствует формированию сгустков. Поэтому после проведения процедуры ооциты промывают или помещают полученную жидкость в специальный раствор, содержащий антикоагулянты.
Все манипуляции с материалом осуществляются при помощи специальных пипеток или стеклянных либо пластиковых капилляров с микроаспиратором.
После определения комплексов ооцит-кумулюс фоликулярная жидкость помещается в чашу Петри и рассматривается под микроскопом. Ооциты при их наличии визуализируются как блестящие комки слизистой структуры.
Обнаруженные ооциты перемещаются в среду для омывки и после ее проведения перемещаются в специальную чашу, где будет осуществляться искусственное оплодотворение. После помещения в культуральную среду производится оценка количества и качества ооцит-кумулюс, а также степень зрелости. Она основывается на визуальном анализе морфологии комплекса. Результаты изучения могут быть субъективными и не отображать реальной картины. Нередко отмечается асинхронность созревания ядер ооплазмы, яйцеклетки и кумулюс. Незрелые клетки определяются как находящиеся в стадии мейоза.
Зрелая яйцеклетка имеет диаметр 110-120 мкм, а также окружена:
- блестящей пленкой;
- несколькими клетками лучистого венца;
- большим количеством клеток яйценосного бугорка.
У взятой яйцеклетки должна быть закончена первая стадия мейоза, после которой отделяется первое полярное тельце. Второе деление чаще всего пребывает в стадии метафазы. Хромосомы формируют ряд, создавая метафазную пластинку, локализующуюся над полярным тельцем. Кроме того, в яйцеклетке осуществляется блок мейоза, который снимает сперматозоид, проникший в оболочку.
Степень зрелости яйцеклеток, полученных в результате стимуляции овуляции, может сильно варьироваться. Наряду со зрелыми клетками, в полученном материале могут присутствовать ооциты, находящиеся на стадии зародышевого пузырька, а также перезревшие и не пригодные для дальнейших манипуляций.
